Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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TR2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423489
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- TR2 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico TR2, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: TR2 Anticuerpo (D-4): sc-374049
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
TR2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-423489 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
El gen murino **Nr2c1** codifica el receptor nuclear huérfano **TR2**, un factor de transcripción específico de secuencia que se une a elementos de respuesta hormonal y modula programas de expresión génica vinculados a decisiones sobre el destino celular. TR2 participa en la señalización de receptores nucleares y en redes de correpresores y coactivadores transcripcionales que influyen en la diferenciación, la proliferación y la homeostasis metabólica, con funciones destacadas descritas en el desarrollo de células germinales y en circuitos reguladores asociados a la pluripotencia. A través de estas funciones transcripcionales, **NR2C1** puede afectar el estado de la cromatina y las vías de compromiso de linaje, que con frecuencia se ven alteradas en anomalías del desarrollo y en la desregulación transcripcional relacionada con el cáncer. En consecuencia, **Nr2c1** es una diana útil para diseccionar mecanismos de regulación génica subyacentes a estados tipo madre y a la diferenciación específica de tejido en modelos murinos.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO TR2 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Nr2c1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Nr2c1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Nr2c1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína TR2.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Nr2c1 para la investigación de la señalización de TR2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Nr2c1 críticos para la función de TR2
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Nr2c1 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido TR2 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido TR2 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Nr2c1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR TR2 (m) y el plásmido HDR TR2 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Nr2c1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Nr2c1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.