Plasmide CRISPR/Cas9 KO TP53INP2 (m): sc-427155
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- TP53INP2 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique TP53INP2, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO TP53INP2 (m) | sc-427155 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Trp53inp2 code TP53INP2, une protéine nucléaire et cytoplasmique induite par le stress, impliquée dans la régulation de l’autophagie et de programmes transcriptionnels liés à l’homéostasie cellulaire. Il a été rapporté que TP53INP2 participe à la formation et au trafic des autophagosomes via des interactions avec la machinerie de l’autophagie, soutenant des voies de détection des nutriments et de contrôle qualité des organites. Dans des modèles murins et des systèmes cellulaires, l’activité de TP53INP2 est couramment étudiée dans le contexte de l’adaptation métabolique, des décisions de survie cellulaire et des réponses au stress oxydatif ou génotoxique. Le dérèglement de l’autophagie et de la signalisation du stress associées à TP53INP2 est pertinent pour l’étude de la biologie tumorale, des états inflammatoires et des processus neurodégénératifs, où une protéostasie altérée constitue une caractéristique majeure.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO TP53INP2 (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Trp53inp2 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Trp53inp2, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Trp53inp2 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine TP53INP2.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Trp53inp2 pour l'étude de la signalisation de TP53INP2, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Trp53inp2 essentiels à la fonction de TP53INP2
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Trp53inp2 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le TP53INP2 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le TP53INP2 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Trp53inp2. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le TP53INP2 plasmide HDR (m) et le TP53INP2 (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Trp53inp2 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Trp53inp2 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.