TICAM-1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-414627

Descripción general

TICAM1 codifica TICAM-1 (también conocido como TRIF), un adaptador citosólico que conecta el receptor tipo Toll 3 y la rama de la señalización de TLR4 dependiente de TRAM con programas transcripcionales de la inmunidad innata. Tras la activación del receptor, TICAM-1 coordina el ensamblaje de complejos de señalización que activan TBK1/IKKε e IRF3 para inducir respuestas de interferón de tipo I, y también contribuye a la activación de las vías NF-κB y MAPK para modular la expresión de citocinas inflamatorias. Este nodo es central para la detección antiviral de ARN de doble cadena y la regulación de la homeostasis inmunitaria innata en compartimentos mieloides y epiteliales. La señalización desregulada de TICAM-1 se ha implicado en respuestas alteradas del huésped a la infección viral y en fenotipos inflamatorios relevantes para mecanismos de enfermedad mediada por el sistema inmunitario.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO TICAM-1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen TICAM1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del TICAM1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de TICAM1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína TICAM-1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en TICAM1 para la investigación de la señalización de TICAM-1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de TICAM1 críticos para la función de TICAM-1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de TICAM1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido TICAM-1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido TICAM-1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus TICAM1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR TICAM-1 (h) y el plásmido HDR TICAM-1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología TICAM1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana TICAM1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.