THOC1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403390

Descripción general

THOC1 codifica una subunidad central del complejo THO/TREX, que acopla la transcripción con el procesamiento del ARNm y su exportación nuclear mediante la coordinación del ensamblaje cotranscripcional de las ribonucleoproteínas mensajeras (mRNP). A través de interacciones con la ARN polimerasa II y factores de exportación, THOC1 favorece la maduración de transcritos en todo el genoma, preserva la homeostasis de los R-loops y ayuda a mantener la integridad de la replicación y la transcripción. La alteración de la exportación de ARN dependiente de THOC1 puede perturbar la progresión del ciclo celular y las respuestas al estrés, vinculando este factor con vías que influyen en la estabilidad genómica. Se han observado cambios en la expresión de THOC1 y disfunción del complejo TREX en múltiples contextos relacionados con el cáncer y en estudios de trastornos del metabolismo del ARN, lo que convierte a THOC1 en un nodo útil para investigaciones mecanísticas.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO THOC1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen THOC1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del THOC1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de THOC1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína THOC1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en THOC1 para la investigación de la señalización de THOC1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de THOC1 críticos para la función de THOC1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de THOC1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido THOC1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido THOC1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus THOC1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR THOC1 (h) y el plásmido HDR THOC1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología THOC1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana THOC1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.