Tenascin-R CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-423465

概要

Tnr はテンアシンR（Tenascin-R）をコードする遺伝子で、テンアシンRは中枢神経系に豊富に存在する細胞外マトリックス糖タンパク質であり、神経発生および回路成熟の過程における細胞—細胞間相互作用や細胞—マトリックス間相互作用を調節します。テンアシンRは、周囲神経網（perineuronal net）を形作る接着分子やプロテオグリカンとの相互作用などを介して、神経突起伸長、軸索誘導、シナプスの安定化、髄鞘化に寄与します。細胞外シグナル伝達や構造的可塑性に影響を与えることで、神経細胞の結合性や活動依存的リモデリングといったプロセスにも関与します。テンアシンRの機能または発現の変化は、神経発達および神経精神疾患に関連する表現型と関連づけられており、マウスモデルにおけるシナプス構築やネットワーク興奮性の基盤メカニズムを研究するうえで重要な標的となります。

Tenascin-R CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるTnr遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Tnr内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Tnrのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Tenascin-Rタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Tenascin-Rシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Tnr欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Tenascin-Rの機能に不可欠なTnrエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Tnrゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Tenascin-R CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびTenascin-R CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Tnr遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Tenascin-R HDRプラスミド（m）および Tenascin-R HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはTnrホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のTnr標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。