Tankyrase-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-423456

概要

マウスのTnksは、PARPファミリーに属するポリ（ADP-リボース）ポリメラーゼであるタンクyrase-1をコードしており、タンパク質基質を修飾することで、それらの安定性や相互作用を調節する。タンクyrase-1は、PARylation（ポリADPリボシル化）依存的にAXINのターンオーバーを制御することにより、Wnt/β-カテニンシグナル伝達の重要な結節点として機能する。また、テロメア維持、有糸分裂の進行、ならびに小胞輸送にも寄与する。細胞骨格の構築やゲノムの完全性に影響を及ぼすことで、タンクyrase-1は異常増殖や染色体不安定性に関連する経路に関与し、マウスモデルにおけるがん原性シグナル伝達やDNA関連プロセスの機構研究において重要な標的となる。

Tankyrase-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるTnks遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Tnks内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Tnksのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Tankyrase-1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Tankyrase-1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Tnks欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Tankyrase-1の機能に不可欠なTnksエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Tnksゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Tankyrase-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびTankyrase-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Tnks遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Tankyrase-1 HDRプラスミド（m）および Tankyrase-1 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはTnksホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のTnks標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。