TAF II p250 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-435426

Descripción general

Taf1 codifica TAF II p250 (TAF1), una subunidad central del complejo TFIID que nuclea el ensamblaje del complejo de preiniciación de la ARN polimerasa II e integra el reconocimiento del promotor con la salida transcripcional. Como regulador multifuncional con actividades de quinasa y acetiltransferasa, TAF1 influye en la organización de la cromatina, el inicio de la transcripción y los programas de expresión génica vinculados al ciclo celular. En sistemas murinos, el control transcripcional dependiente de Taf1 es fundamental para el desarrollo embrionario, la regulación de genes neuronales y las vías de proteostasis que modelan las respuestas celulares al estrés. La desregulación de TAF1 y de la transcripción mediada por TFIID se ha asociado con fenotipos del neurodesarrollo y con alteraciones más amplias de la homeostasis de la expresión génica relevantes para el modelado de enfermedades.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO TAF II p250 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Taf1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Taf1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Taf1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína TAF II p250.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Taf1 para la investigación de la señalización de TAF II p250, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Taf1 críticos para la función de TAF II p250
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Taf1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido TAF II p250 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido TAF II p250 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Taf1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR TAF II p250 (m) y el plásmido HDR TAF II p250 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Taf1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Taf1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.