Superoxide Dismutase 1/SOD1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423069

Descripción general

Sod1 codifica la superóxido dismutasa citosólica Cu/Zn SOD1, una enzima antioxidante principal que convierte el anión superóxido en peróxido de hidrógeno y oxígeno para limitar el daño oxidativo. Al modular la homeostasis redox celular, SOD1 influye en la función mitocondrial, el control de calidad proteica y las vías de señalización sensibles al estrés, incluidos los programas antioxidantes mediados por NRF2. La alteración de la actividad de SOD1 modifica la susceptibilidad al estrés oxidativo, la neuroinflamación y la proteotoxicidad, y la disfunción de SOD1 se utiliza ampliamente como punto de partida mecanístico para estudiar la neurodegeneración y fenotipos relacionados de neuronas motoras. En sistemas murinos, Sod1 sirve como un modelo manejable para vincular el control de las especies reactivas de oxígeno con el metabolismo, la lesión tisular asociada al envejecimiento y la regulación transcripcional sensible al estado redox.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Superoxide Dismutase 1/SOD1 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Sod1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Sod1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Sod1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Superoxide Dismutase 1/SOD1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Sod1 para la investigación de la señalización de Superoxide Dismutase 1/SOD1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Sod1 críticos para la función de Superoxide Dismutase 1/SOD1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Sod1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Superoxide Dismutase 1/SOD1 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido Superoxide Dismutase 1/SOD1 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Sod1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Superoxide Dismutase 1/SOD1 (m) y el plásmido HDR Superoxide Dismutase 1/SOD1 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Sod1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Sod1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.