SUMO-1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423588

Descripción general

Sumo1 codifica SUMO-1, un modificador similar a la ubiquitina que se conjuga covalentemente a residuos de lisina en proteínas diana para regular su localización, estabilidad y redes de interacción. La SUMOilación influye en diversos procesos celulares, como la señalización y reparación del daño en el ADN, la organización de la cromatina, el control transcripcional, el transporte nuclear y la progresión del ciclo celular, a través de cascadas enzimáticas coordinadas E1–E2–E3 y proteasas específicas de SUMO. La modificación por SUMO-1 a menudo se entrecruza con la degradación dependiente de ubiquitina y con vías de respuesta al estrés, moldeando la proteostasis y la dinámica de señalización en el núcleo y el citoplasma. La SUMOilación desregulada se ha vinculado a mecanismos relevantes para la biología del cáncer, la neurodegeneración y la regulación inmunitaria, lo que convierte a Sumo1 en un nodo útil para estudios a nivel de vías en modelos murinos y sistemas celulares.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO SUMO-1 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Sumo1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Sumo1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Sumo1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína SUMO-1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Sumo1 para la investigación de la señalización de SUMO-1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Sumo1 críticos para la función de SUMO-1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Sumo1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido SUMO-1 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido SUMO-1 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Sumo1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR SUMO-1 (m) y el plásmido HDR SUMO-1 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Sumo1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Sumo1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.