Stra6 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405364

Descripción general

STRA6 codifica Stra6, un receptor de membrana de múltiples pasos que media la captación celular de vitamina A al unirse en la superficie celular a complejos de retinol con la proteína fijadora de retinol (RBP). Al controlar la disponibilidad intracelular de retinoides, Stra6 influye en la señalización del ácido retinoico y en programas transcripcionales posteriores que regulan la diferenciación, la homeostasis epitelial y el patrón del desarrollo. La actividad de STRA6 se interseca con redes del metabolismo de retinoides en las que participan LRAT, enzimas RDH/ALDH y receptores nucleares del ácido retinoico, modelando así decisiones de destino celular y la integridad tisular. La desregulación o variación genética en STRA6 se ha relacionado con anomalías del desarrollo y fenotipos asociados a la visión, compatibles con un transporte y una señalización de retinoides alterados.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Stra6 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen STRA6 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del STRA6 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de STRA6 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Stra6.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en STRA6 para la investigación de la señalización de Stra6, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de STRA6 críticos para la función de Stra6
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de STRA6 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Stra6 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Stra6 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus STRA6. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Stra6 (h) y el plásmido HDR Stra6 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología STRA6 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana STRA6 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.