Stra6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-405364

概要

STRA6は、細胞膜を複数回貫通する膜受容体Stra6をコードしており、細胞表面でレチノール‐レチノール結合タンパク質（RBP）複合体に結合することで、ビタミンAの細胞内取り込みを媒介する。細胞内レチノイドの利用可能性を制御することにより、Stra6はレチノイン酸シグナル伝達および、その下流で分化、上皮の恒常性、発生パターン形成を制御する転写プログラムに影響を与える。STRA6の活性は、LRAT、RDH/ALDH酵素群、核内レチノイン酸受容体を含むレチノイド代謝ネットワークと交差し、細胞運命の決定や組織の健全性の維持を形作る。STRA6の機能異常や遺伝的変異は、レチノイドの輸送およびシグナル伝達の攪乱と整合する、発生異常や視覚に関連した表現型と関連付けられている。

Stra6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるSTRA6遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、STRA6内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、STRA6のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Stra6タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Stra6シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、STRA6欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Stra6の機能に不可欠なSTRA6エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、STRA6ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Stra6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびStra6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、STRA6遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Stra6 HDRプラスミド（h）および Stra6 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSTRA6ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSTRA6標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。