STK32A CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-408625

Übersicht

STK32A kodiert eine Serin/Threonin-Proteinkinase, die an der phosphorylierungsabhängigen Kontrolle der Zellsignalisierung beteiligt ist und mutmaßliche Funktionen bei der Regulation von Zellwachstum, Differenzierung sowie zytoskelettassoziierten Prozessen besitzt. Als Mitglied einer Kinasefamilie ist STK32A in der Lage, Kinasekaskaden zu beeinflussen, die Transkriptionsprogramme und stressresponsive Signalausgänge prägen. Veränderte Kinaseaktivität oder -expression ist häufig mit dysregulierter Proliferation und kontextabhängiger Umverdrahtung von Signalwegen bei Krebs und anderen komplexen Erkrankungen verknüpft, was STK32A für mechanistische Studien relevant macht. Die Charakterisierung STK32A-abhängiger Phosphorylierungsnetzwerke kann aufklären, wie sich die Signalkonnektivität über unterschiedliche Zellzustände und Krankheitsmodelle hinweg verändert.

Das STK32A CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des STK32A-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des STK32A-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von STK32A nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die STK32A-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von STK32A-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der STK32A-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf STK32A-Exone abzielen, die für die STK32A-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere STK32A-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom STK32A CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom STK32A CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des STK32A-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das STK32A HDR-Plasmid (h) und STK32A HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von STK32A-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten STK32A-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.