Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
SRm300 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403447
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- SRm300 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico SRm300, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: SRm300 Anticuerpo (C-9): sc-390315
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
SRm300 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-403447 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
SRRM2 codifica SRm300, un gran cofactor de empalme rico en serina/arginina que se localiza en los speckles nucleares y favorece el ensamblaje del espliceosoma y el procesamiento del pre-ARNm. SRm300 contribuye a las decisiones de empalme alternativo y coordina el acoplamiento entre transcripción y empalme, influyendo en la maduración del ARN, la competencia para la exportación del ARNm y la diversidad del proteoma. A través de estas funciones, SRRM2 afecta a vías vinculadas a la regulación del ciclo celular, las respuestas al daño del ADN y programas de expresión génica adaptativos al estrés. La desregulación de redes de empalme dependientes de SRRM2 se ha asociado con un uso anómalo de isoformas observado en contextos de cáncer y de enfermedades del neurodesarrollo o neurodegenerativas, lo que la hace relevante para estudios mecanísticos del procesamiento del ARN.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO SRm300 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen SRRM2 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del SRRM2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de SRRM2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína SRm300.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en SRRM2 para la investigación de la señalización de SRm300, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de SRRM2 críticos para la función de SRm300
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de SRRM2 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido SRm300 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido SRm300 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus SRRM2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR SRm300 (h) y el plásmido HDR SRm300 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología SRRM2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana SRRM2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.