SOCS-5 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-402585

Übersicht

SOCS5 kodiert den „Suppressor of Cytokine Signaling 5“ (SOCS-5), ein Mitglied der SOCS-Familie, das die Signalübertragung von Zytokinen und Wachstumsfaktorrezeptoren durch SH2-vermittelte Zielerkennung und die SOCS-Box–abhängige Rekrutierung von Ubiquitin-Ligase-Komplexen abschwächt. SOCS-5 ist an der negativen Regulation der JAK/STAT-Signalgebung beteiligt und kann rezeptorassoziierte Signalwege modulieren, die mit der Aktivierung von Immunzellen, Entzündungsreaktionen und Differenzierungsprogrammen verknüpft sind. Durch die Kontrolle von Signalstärke und -dauer trägt SOCS-5 zur Feedback-Regulation zytokingetriebener transkriptioneller Outputs sowie zur Wechselwirkung („Cross-talk“) mit MAPK-assoziierten Prozessen bei. Eine dysregulierte SOCS5-Expression oder -Funktion wurde mit aberranter Immunsignalgebung in Verbindung gebracht und in Zusammenhängen wie der krebsassoziierten Umprogrammierung von Signalwegen sowie Mechanismen entzündlicher Erkrankungen untersucht.

Das SOCS-5 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des SOCS5-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des SOCS5-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von SOCS5 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die SOCS-5-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von SOCS5-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der SOCS-5-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf SOCS5-Exone abzielen, die für die SOCS-5-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere SOCS5-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom SOCS-5 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom SOCS-5 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des SOCS5-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das SOCS-5 HDR-Plasmid (h) und SOCS-5 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von SOCS5-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten SOCS5-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.