Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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SNARK Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405079
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- SNARK O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico SNARK, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:SNARK Anticorpo (C-12): sc-374348
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
SNARK Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-405079 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
NUAK2 codifica a SNARK (quinase relacionada a SNF1/AMPK), uma quinase de serina/treonina da família de quinases relacionadas à AMPK que conecta o estado energético celular a programas de sinalização adaptativos. A SNARK é ativada a jusante de LKB1/STK11 e participa de redes de fosforilação que influenciam a remodelação do citoesqueleto, a adesão e migração celulares e a regulação metabólica responsiva ao estresse. Funções descritas conectam NUAK2 a vias que governam a transição epitélio–mesênquima, os outputs transcricionais associados a Hippo/YAP e o controle dependente do contexto da proliferação e da sobrevivência. A atividade desregulada de NUAK2/SNARK tem sido associada à biologia do câncer e a fenótipos invasivos, sustentando seu uso como alvo para estudos mecanísticos do acoplamento entre metabolismo e motilidade.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO SNARK (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene NUAK2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do NUAK2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do NUAK2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína SNARK.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de NUAK2 para a investigação da sinalização de SNARK, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) NUAK2 críticos para a função SNARK
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos NUAK2 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo SNARK Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo SNARK Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus NUAK2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo SNARK Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR SNARK (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia NUAK2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo NUAK2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.