SLITRK4 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-414460

Descripción general

SLITRK4 codifica una proteína transmembrana neuronal de la familia SLITRK, implicada en el crecimiento de neuritas, el desarrollo de sinapsis y los procesos de adhesión célula-célula que moldean la formación de circuitos neuronales. A través de motivos extracelulares de repeticiones ricas en leucina y de interfaces intracelulares de señalización, SLITRK4 se asocia con vías que regulan la sinaptogénesis, el patrón de axones y dendritas y la conectividad neuronal. Los patrones de expresión en el sistema nervioso y la homología funcional entre las proteínas SLITRK respaldan un papel en la biología relevante para el neurodesarrollo y los trastornos neuropsiquiátricos. La alteración de la actividad de la familia SLITRK se ha investigado en el contexto de disfunciones a nivel de circuitos, lo que hace de SLITRK4 una diana útil para estudios mecanísticos en modelos neuronales.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO SLITRK4 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen SLITRK4 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del SLITRK4 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de SLITRK4 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína SLITRK4.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en SLITRK4 para la investigación de la señalización de SLITRK4, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de SLITRK4 críticos para la función de SLITRK4
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de SLITRK4 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido SLITRK4 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido SLITRK4 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus SLITRK4. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR SLITRK4 (h) y el plásmido HDR SLITRK4 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología SLITRK4 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana SLITRK4 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.