SLC35A2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-423599

概要

Slc35a2 は、ゴルジ体に局在する UDP-ガラクトース輸送体である SLC35A2 をコードしており、糖タンパク質および糖脂質のガラクトシル化を支えるために、ヌクレオチド糖基質を分泌経路内へ取り込みます。糖鎖成熟を制御することで、SLC35A2 はタンパク質の折りたたみ、小胞輸送、細胞間接着、受容体シグナル伝達に影響し、適切な細胞表面糖鎖修飾に依存する経路に下流の作用を及ぼします。UDP-ガラクトース輸送の攪乱は ER/ゴルジ体の恒常性や膜タンパク質機能を変化させ、神経発生や免疫細胞間相互作用などの過程に影響を与える可能性があります。SLC35A2 に関連する糖鎖修飾異常は先天性糖鎖合成異常症（CDG）や、神経発達および上皮組織機能に関わるより広範な表現型と関連づけられており、マウスモデルにおける機構解明研究の重要な標的となります。

SLC35A2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるSlc35a2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Slc35a2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Slc35a2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、SLC35A2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、SLC35A2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Slc35a2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• SLC35A2の機能に不可欠なSlc35a2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Slc35a2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• SLC35A2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびSLC35A2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Slc35a2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  SLC35A2 HDRプラスミド（m）および SLC35A2 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSlc35a2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSlc35a2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。