Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Plasmide CRISPR/Cas9 KO SLC26A3 (h): sc-403891
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- SLC26A3 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique SLC26A3, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: SLC26A3 Antibody (H-8): sc-376187
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO SLC26A3 (h) | sc-403891 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
SLC26A3 code un échangeur d’anions membranaire (également appelé DRA) qui assure un échange électroneutre Cl⁻/HCO₃⁻ à la surface apicale des cellules épithéliales, jouant un rôle majeur dans l’absorption intestinale des liquides et des électrolytes. En régulant la sécrétion de bicarbonate et la captation de chlorure, SLC26A3 contribue au contrôle du pH luminal et aux processus de transport épithélial en interaction avec la gestion des ions dépendante de CFTR et l’homéostasie de la muqueuse. L’altération ou la dérégulation de SLC26A3 a été associée à la diarrhée chlorée congénitale ainsi qu’à des phénotypes plus larges impliquant la fonction de barrière épithéliale et la signalisation inflammatoire dans le tractus gastro-intestinal. Son expression et son activité sont donc pertinentes pour les études portant sur la différenciation épithéliale, la physiologie du transport et le remodelage du microenvironnement intestinal associé à l’inflammation.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO SLC26A3 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène SLC26A3 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du SLC26A3, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert SLC26A3 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine SLC26A3.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en SLC26A3 pour l'étude de la signalisation de SLC26A3, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de SLC26A3 essentiels à la fonction de SLC26A3
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de SLC26A3 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le SLC26A3 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le SLC26A3 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus SLC26A3. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le SLC26A3 plasmide HDR (h) et le SLC26A3 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie SLC26A3 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles SLC26A3 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.