Septin 3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406325

概要

SEPT3は、セプチンファミリーに属するGTP結合性の細胞骨格タンパク質であるセプチン3をコードしており、ヘテロオリゴマー性のフィラメントやリング状構造を形成して膜ドメインを組織化します。セプチン3は、足場機能および拡散バリア機能を介して、小胞輸送、神経突起伸長、サイトカイネシスおよび細胞極性の空間的制御など、アクチン／微小管に関連する過程に寄与します。神経系では、SEPT3の発現はニューロンで高く、シナプス構造や小胞ダイナミクスの制御との関連が示されており、神経分化やシナプス伝達を司る経路と結び付けられています。セプチンネットワークの組織化異常やSEPT3に関連する変化は、神経変性や腫瘍生物学の研究で報告されており、細胞骨格および膜リモデリング研究における機構的な要所（ノード）としての有用性が示唆されています。

Septin 3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるSEPT3遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、SEPT3内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、SEPT3のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Septin 3タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Septin 3シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、SEPT3欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Septin 3の機能に不可欠なSEPT3エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、SEPT3ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Septin 3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびSeptin 3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、SEPT3遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Septin 3 HDRプラスミド（h）および Septin 3 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSEPT3ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSEPT3標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。