Plasmide CRISPR/Cas9 KO SENP7 (h): sc-405886

Présentation

SENP7 (protéase 7 spécifique de la sentrine) est une isopeptidase spécifique des SUMO qui enlève les modifications SUMO2/3 des protéines cibles, régulant ainsi la dynamique de la SUMOylation et la fonction des protéines. Elle a été associée à des processus liés à la chromatine, notamment le maintien de l’hétérochromatine et la réponse aux dommages de l’ADN, où la signalisation dépendante des SUMO contribue à coordonner le recrutement des facteurs de réparation et la stabilité du génome. Par ces activités, SENP7 influence la progression du cycle cellulaire et des programmes transcriptionnels sensibles à l’état de la chromatine. Une activité dérégulée des protéases SUMO, y compris une altération de la fonction de SENP7, est pertinente pour l’étude du stress oncogénique, des dommages associés à la réplication et d’autres contextes où une régulation aberrante de la chromatine contribue aux phénotypes pathologiques.

Le plasmide CRISPR/Cas9 KO SENP7 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène SENP7 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du SENP7, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.

La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert SENP7 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine SENP7.

Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en SENP7 pour l'étude de la signalisation de SENP7, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.

Caractéristiques principales

• sgRNA ciblant le ou les exons de SENP7 essentiels à la fonction de SENP7
  Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
  Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
  Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de SENP7 pour améliorer l'efficacité du knock-out
  Compatible avec l'administration par transfection

Variantes de conception

CRISPR +/- HDR

• Les gRNA codés par le SENP7 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le SENP7 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus SENP7. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
  Les constructions donneuses HDR codées par le SENP7 plasmide HDR (h) et le SENP7 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie SENP7 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles SENP7 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.