SELENBP1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-422870

Übersicht

Selenbp1 kodiert das Selen-bindende Protein 1 (SELENBP1), ein zytosolisches Protein, das an der zellulären Handhabung von Selen sowie am redox-assoziierten Stoffwechsel beteiligt ist. In Mausgeweben wird SELENBP1 mit der Regulation von oxidativen Stressantworten und metabolischer Anpassung in Verbindung gebracht; zudem wurden Zusammenhänge mit der Verarbeitung von Xenobiotika und Programmen der zellulären Differenzierung beschrieben. Eine veränderte SELENBP1-Menge wurde in mehreren experimentellen Systemen mit Veränderungen in Proliferation und Stresssignalgebung assoziiert, was es für die Untersuchung kontextabhängiger metabolischer und Redox-Phänotypen relevant macht. Als selenassoziierter Faktor stellt SELENBP1 einen gut untersuchbaren Knotenpunkt dar, um zu analysieren, wie die Selenverwertung mit homöostatischen Signalwegen zusammenwirkt, die die zelluläre Fitness prägen.

Das SELENBP1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Selenbp1-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Selenbp1-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Selenbp1 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die SELENBP1-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Selenbp1-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der SELENBP1-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf Selenbp1-Exone abzielen, die für die SELENBP1-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere Selenbp1-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom SELENBP1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom SELENBP1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Selenbp1-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das SELENBP1 HDR-Plasmid (m) und SELENBP1 HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Selenbp1-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Selenbp1-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.