Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO SEC13 (h): sc-403302
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- SEC13 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique SEC13, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: SEC13 Antibody (F-6): sc-514308
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO SEC13 (h) | sc-403302 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
SEC13 code pour Sec13, un composant essentiel du manteau COPII qui s’associe à Sec31 pour former la cage externe nécessaire au bourgeonnement des vésicules à partir du réticulum endoplasmique et au transport du RE vers l’appareil de Golgi. Au-delà du trafic sécrétoire, Sec13 participe également à l’architecture du complexe du pore nucléaire et contribue à la protéostasie en influençant l’export des cargos et les réponses au stress du RE. Ces fonctions relient SEC13 à des voies qui régulent le remodelage membranaire, la sécrétion protéique et l’homéostasie des compartiments intracellulaires. La dérégulation de la capacité de la voie sécrétoire et du transport nucléaire est fréquemment exploitée dans des études sur l’adaptation au stress cellulaire et la signalisation proliférative dans des contextes pertinents pour les maladies.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO SEC13 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène SEC13 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du SEC13, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert SEC13 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine SEC13.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en SEC13 pour l'étude de la signalisation de SEC13, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de SEC13 essentiels à la fonction de SEC13
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de SEC13 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le SEC13 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le SEC13 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus SEC13. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le SEC13 plasmide HDR (h) et le SEC13 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie SEC13 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles SEC13 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.