SCG10 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m2): sc-422814-KO-2

Descripción general

Stmn2 codifica SCG10, un miembro de la familia de las estatminas enriquecido en neuronas que se une a la tubulina y favorece la desestabilización de los microtúbulos, lo que sustenta la remodelación dinámica del citoesqueleto durante el crecimiento de neuritas y la guía axonal en el desarrollo del sistema nervioso del ratón. La actividad de SCG10 influye en el comportamiento del cono de crecimiento, el tráfico intracelular y la plasticidad dependiente de la actividad al acoplar señales de señalización con el recambio de microtúbulos. La desregulación de STMN2/SCG10 se ha relacionado con respuestas al estrés neuronal y con alteraciones en el mantenimiento axonal, lo que la hace relevante para estudios de neurodegeneración y vulnerabilidad de las motoneuronas. En modelos celulares, la alteración de SCG10 afecta los programas de diferenciación neuronal, los fenotipos de regeneración axonal y procesos sinápticos dependientes del citoesqueleto.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO SCG10 (m2) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Stmn2 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Stmn2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Stmn2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína SCG10.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Stmn2 para la investigación de la señalización de SCG10, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Stmn2 críticos para la función de SCG10
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Stmn2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido SCG10 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido SCG10 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Stmn2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR SCG10 (m) y el plásmido HDR SCG10 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Stmn2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Stmn2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.