SCG10 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m2): sc-422814-KO-2

概要

Stmn2はSCG10をコードしている。SCG10はスタスミンファミリーに属するニューロン豊富なタンパク質で、チューブリンに結合して微小管の不安定化を促進し、マウス神経系の発生における神経突起伸長や軸索誘導の過程で、細胞骨格の動的な再編成を支える。SCG10の活性は、シグナル入力を微小管のターンオーバーに結び付けることで、成長円錐の挙動、細胞内輸送、ならびに活動依存的な可塑性に影響を与える。STMN2/SCG10の制御異常は、神経細胞のストレス応答や軸索維持の変化と関連づけられており、神経変性や運動ニューロンの脆弱性を研究する上で重要である。細胞モデルでは、SCG10を攪乱すると、神経分化プログラム、軸索再生の表現型、そして細胞骨格依存的なシナプス過程に影響が及ぶ。

SCG10 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）は、mouse細胞株におけるStmn2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Stmn2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Stmn2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、SCG10タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、SCG10シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Stmn2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• SCG10の機能に不可欠なStmn2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Stmn2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• SCG10 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびSCG10 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Stmn2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  SCG10 HDRプラスミド（m）および SCG10 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはStmn2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のStmn2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。