Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO S-100A3 (h): sc-405822
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- S-100A3 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique S-100A3, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: S-100A3 Antibody (A-11): sc-514339
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO S-100A3 (h) | sc-405822 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
S100A3 code la protéine S-100A3, membre de la famille S100 liant le calcium, particulièrement abondante dans les épithéliums kératinisants et la biologie du follicule pileux, où elle contribue à l’organisation du cytosquelette et aux programmes de différenciation cellulaire. Par des changements de conformation dépendants du Ca²⁺, S-100A3 peut participer à des interactions protéine–protéine qui influencent le remodelage structurel des épithéliums et des processus sensibles à l’état rédox. Une expression dérégulée des protéines S100, dont S100A3, a été associée à des états de différenciation altérés, à une signalisation inflammatoire et à des phénotypes associés aux tumeurs dans les tissus épithéliaux. Par conséquent, S100A3 est fréquemment étudiée dans des travaux portant sur le développement épithélial, les réponses au stress et les modifications de l’architecture tissulaire pertinentes pour la maladie.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO S-100A3 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène S100A3 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du S100A3, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert S100A3 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine S-100A3.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en S100A3 pour l'étude de la signalisation de S-100A3, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de S100A3 essentiels à la fonction de S-100A3
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de S100A3 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le S-100A3 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le S-100A3 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus S100A3. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le S-100A3 plasmide HDR (h) et le S-100A3 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie S100A3 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles S100A3 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.