Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
RUNX3 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419487
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- RUNX3 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico RUNX3, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: RUNX3 Anticuerpo (A-3): sc-376591
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
RUNX3 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419487 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Runx3 codifica el factor de transcripción RUNX3, una proteína de unión al ADN con dominio Runt que se asocia con CBFB para regular la especificación de linaje y los programas de diferenciación en múltiples tejidos. En sistemas inmunitarios y epiteliales de ratón, RUNX3 integra señales de vías como TGF-β/SMAD y redes transcripcionales del desarrollo para controlar decisiones de destino celular, maduración y la regulación del crecimiento dependiente del contexto. La actividad alterada de Runx3 se ha vinculado a programas transcripcionales desregulados relevantes para la inflamación, la tumorigenia y fenotipos del neurodesarrollo en organismos modelo. Como nodo en la regulación de promotores y potenciadores, RUNX3 se estudia con frecuencia por su impacto en la expresión génica dependiente de la cromatina y en la remodelación de vías aguas abajo.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO RUNX3 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Runx3 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Runx3 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Runx3 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína RUNX3.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Runx3 para la investigación de la señalización de RUNX3, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Runx3 críticos para la función de RUNX3
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Runx3 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido RUNX3 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido RUNX3 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Runx3. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR RUNX3 (m) y el plásmido HDR RUNX3 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Runx3 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Runx3 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.