RIP140 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-435290

概要

マウスのNrip1はRIP140（NRIP1）をコードしており、リガンド依存性の核内受容体コレギュレーターとして、主にHDACを含む複合体などのクロマチン修飾複合体をリクルートすることで転写コリプレッサーとして機能します。RIP140は、PPAR、ER、TR、RXRなどの核内受容体からのシグナルを統合し、ミトコンドリア機能、酸化代謝、脂肪細胞分化、炎症性転写出力を制御する遺伝子プログラムを調節します。これらの経路を通じて、Nrip1は代謝恒常性、エネルギー消費、ならびにマクロファージ介在性の炎症応答を研究するために広く利用されています。RIP140依存的な転写制御の破綻は、前臨床研究において、肥満、インスリン抵抗性、脂肪肝の生物学、ホルモン応答性腫瘍モデルに関連する表現型と関連づけられています。

RIP140 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるNrip1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Nrip1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Nrip1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、RIP140タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、RIP140シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Nrip1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• RIP140の機能に不可欠なNrip1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Nrip1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• RIP140 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびRIP140 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Nrip1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  RIP140 HDRプラスミド（m）および RIP140 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはNrip1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のNrip1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。