Ribosomal Protein S13 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406367

Descripción general

RPS13 codifica la proteína ribosomal S13, un componente esencial de la subunidad ribosomal pequeña 40S que favorece el ensamblaje del ribosoma, el procesamiento de ARNr y la decodificación precisa del ARNm durante la traducción. A través de su función en la síntesis proteica citosólica, RPS13 contribuye al control del crecimiento celular y a la proteostasis, y se conecta con vías sensibles a la capacidad traduccional, incluidas respuestas adaptativas al estrés y de vigilancia nucleolar. La alteración de la homeostasis de las proteínas ribosomales se ha vinculado a ribosomopatías y se ha asociado con programas de proliferación modificados observados en múltiples contextos de cáncer, lo que convierte a RPS13 en un nodo útil para estudiar cómo la producción traduccional moldea el estado celular. Como factor ribosomal conservado, RPS13 también es relevante para investigar la dinámica global de la traducción, la traducción selectiva de ARNm y las consecuencias de un desequilibrio en la biogénesis ribosomal.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Ribosomal Protein S13 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen RPS13 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del RPS13 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de RPS13 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Ribosomal Protein S13.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en RPS13 para la investigación de la señalización de Ribosomal Protein S13, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de RPS13 críticos para la función de Ribosomal Protein S13
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de RPS13 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Ribosomal Protein S13 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Ribosomal Protein S13 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus RPS13. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Ribosomal Protein S13 (h) y el plásmido HDR Ribosomal Protein S13 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología RPS13 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana RPS13 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.