Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO RGS8 (h): sc-403199
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- RGS8 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique RGS8, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: RGS8 Antibody (F-3): sc-398949
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO RGS8 (h) | sc-403199 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
RGS8 (regulator of G protein signaling 8) est une protéine activatrice de l’activité GTPase qui accélère l’arrêt des signaux initiés par les GPCR en favorisant l’inactivation de la sous-unité Gα. Dans les cellules humaines, RGS8 module les voies de seconds messagers telles que cAMP/PKA et PLCβ/Ca2+, en façonnant l’amplitude et la durée des réponses induites par les récepteurs. Elle est particulièrement exprimée dans les contextes neuronaux et contribue au contrôle de la signalisation synaptique et de l’excitabilité des réseaux via la régulation des cascades couplées à Gi/o et à Gq. Des altérations de l’expression ou de l’activité de RGS8 ont été étudiées en lien avec une neurotransmission dérégulée et des phénotypes neuropsychiatriques, ce qui en fait une cible pertinente pour des études mécanistiques de l’ajustement fin des voies GPCR.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO RGS8 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène RGS8 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du RGS8, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert RGS8 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine RGS8.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en RGS8 pour l'étude de la signalisation de RGS8, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de RGS8 essentiels à la fonction de RGS8
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de RGS8 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le RGS8 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le RGS8 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus RGS8. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le RGS8 plasmide HDR (h) et le RGS8 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie RGS8 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles RGS8 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.