RGS7 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406720

Descripción general

RGS7 (regulador de la señalización de proteínas G 7) es una proteína activadora de la GTPasa que acelera la terminación de la señalización de los receptores acoplados a proteína G (GPCR) al promover la hidrólisis de GTP en la subunidad Gα, particularmente en las vías acopladas a Gi/o. Funciona de manera destacada en complejos de señalización neuronal, a menudo en asociación con Gβ5 y anclajes de membrana como R7BP, modulando la transmisión sináptica, la dinámica del AMPc y la regulación de canales iónicos. A través de su control de las vías efectoras de los GPCR, RGS7 influye en las respuestas a neurotransmisores y en programas de señalización dependientes de la actividad en el sistema nervioso. La desregulación de la señalización vinculada a RGS7 se ha investigado en el contexto de mecanismos de enfermedades neuropsiquiátricas y neurodegenerativas, en las que se han implicado alteraciones del tono de los GPCR y de la homeostasis sináptica.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO RGS7 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen RGS7 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del RGS7 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de RGS7 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína RGS7.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en RGS7 para la investigación de la señalización de RGS7, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de RGS7 críticos para la función de RGS7
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de RGS7 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido RGS7 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido RGS7 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus RGS7. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR RGS7 (h) y el plásmido HDR RGS7 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología RGS7 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana RGS7 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.