Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Plásmido Doble Nickase (h) RG9MTD1: sc-418590-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)RG9MTD1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa RG9MTD1 (h) y el plásmido de doble nickasa RG9MTD1 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a TRMT10C. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: RG9MTD1 Anticuerpo (A-8): sc-515289
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) RG9MTD1 | sc-418590-NIC | 20 µg | $410.00 |
El TRMT10C humano codifica la subunidad catalítica de la metiltransferasa mitocondrial de ARNt:m1G9, mientras que RG9MTD1 (MRPP1) actúa junto con MRPP2 (HSD17B10) y MRPP3 (KIAA0391) en el complejo mitocondrial RNasa P, que acopla el procesamiento del ARNt con la metilación m1G9. Esta actividad es fundamental para la maduración del ARN mitocondrial, la función del mitorribosoma y una fosforilación oxidativa eficiente, al favorecer una traducción mitocondrial precisa. La alteración del procesamiento del ARNt dependiente de TRMT10C/RG9MTD1 perturba la biogénesis de la cadena respiratoria y la homeostasis energética celular, vinculando esta vía con fenotipos de disfunción mitocondrial observados en contextos de enfermedades neurometabólicas. Como resultado, TRMT10C/RG9MTD1 se estudia con frecuencia en modelos de expresión génica mitocondrial, proteostasis y respuestas al estrés que convergen en el transporte de electrones y la señalización relacionada con la apoptosis.
RG9MTD1 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus TRMT10C en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de TRMT10C. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de TRMT10C. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con TRMT10C alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.