Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Rent3b Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406904
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- Rent3b El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico Rent3b, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Rent3b Anticuerpo (D-1): sc-514564
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Rent3b Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406904 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
UPF3B codifica Rent3b, un componente central de la maquinaria de degradación de ARNm mediada por codones sin sentido (NMD) que protege la integridad del transcriptoma al eliminar ARNm que contienen codones de terminación prematuros y al regular subconjuntos de transcritos fisiológicos. Rent3b se asocia con la vigilancia vinculada al complejo de unión a exones y interactúa con factores de la NMD como UPF2 y UPF1 para acoplar la terminación de la traducción con el recambio dirigido de ARN. A través de estas actividades, UPF3B influye en el control de calidad del ARN, la homeostasis de la expresión génica y las respuestas al estrés celular relacionadas con un procesamiento aberrante del ARNm. La alteración de la NMD dependiente de UPF3B se ha vinculado a fenotipos del neurodesarrollo y a programas de expresión alterados relevantes para trastornos neurológicos y otros trastornos asociados al metabolismo del ARN.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO Rent3b (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen UPF3B en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del UPF3B junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de UPF3B tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Rent3b.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en UPF3B para la investigación de la señalización de Rent3b, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de UPF3B críticos para la función de Rent3b
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de UPF3B para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido Rent3b CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Rent3b CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus UPF3B. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Rent3b (h) y el plásmido HDR Rent3b (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología UPF3B para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana UPF3B definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.