Reg IIIγ CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-418109

概要

REG3G は、ランゲルハンス島由来再生タンパク質 3 ガンマ（Reg IIIγ）をコードしており、これは分泌型の C 型レクチン様抗菌タンパク質として、上皮バリア防御および粘膜表面における自然免疫の調節に関与すると考えられています。Reg IIIγ は細菌の細胞壁グリカンを認識し、微生物の定着制御に寄与することで、その作用は宿主－マイクロバイオーム相互作用や消化管における炎症シグナル伝達と結び付けられています。発現は一般にサイトカイン駆動性の経路、特に IL-22/STAT3 シグナルにより誘導されうるほか、パターン認識受容体の活性化や NF-κB 関連応答の下流で調節されることもあります。REG3G 発現の制御異常は、粘膜免疫の変調や炎症に関連する表現型と関連付けられており、バリア機能障害や免疫介在性疾患の機序を研究するうえでの機能的な結節点として有用であることが示唆されます。

Reg IIIγ CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるREG3G遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、REG3G内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、REG3Gのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Reg IIIγタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Reg IIIγシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、REG3G欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Reg IIIγの機能に不可欠なREG3Gエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、REG3Gゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Reg IIIγ CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびReg IIIγ CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、REG3G遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Reg IIIγ HDRプラスミド（h）および Reg IIIγ HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはREG3Gホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のREG3G標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。