Reg IIIγCRISPR激活质粒(m): sc-422640-ACT
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Reg IIIγ CRISPER激活质粒（m）是一种协同激活介质（SAM）转录激活系统，目的在于特定上调基因表达
- Reg IIIγ CRISPR 激活质粒 (m)包含三种质量比为1:1:1的质粒：一种质粒编码与转录激活结构域VP64融合的去活化的Cas9 (dCas9)核酸酶(D10A and N863A)，和杀稻瘟素抗性基因；一种质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白，和潮霉素抗性基因；一种质粒编码与两个MS2 RNA适体融合的目标特异的20 nt向导RNA，和嘌呤霉素抗性基因。
- 形成的SAM复合物结合到转录起始位点上游大约200-250 nt的特定位点区域，为高效激活基因提供转录因子的招募
- 由 Reg IIIγ CRISPR 激活质粒 (m) 和 Reg IIIγ CRISPR 激活质粒 (m2) 编码的 gRNA 分别针对 Reg3g 转录起始位点上游的不同调控区域。其中一种或两种设计可能可用
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Reg IIIγCRISPR激活质粒(m) | sc-422640-ACT | 20 µg | $397.00 | |||
Reg IIIγCRISPR激活质粒(m2) | sc-422640-ACT-2 | 20 µg | $397.00 |
Reg3g 编码胰岛再生衍生蛋白 3γ（Reg IIIγ）。Reg IIIγ 是一种分泌型 C 型凝集素，富集于肠上皮细胞和潘氏细胞区室；它通过结合细菌肽聚糖并塑造宿主–微生物群相互作用，促进黏膜屏障防御。其表达可被细胞因子信号与微生物感知通路强烈诱导，包括 IL-22/STAT3 信号以及 Toll 样受体依赖的先天免疫反应，从而将 Reg IIIγ 与上皮修复和抗菌程序联系起来。REG3 家族活性的改变与屏障表面的炎症状态相关，因此在小鼠模型中，Reg3g 可作为研究肠道炎症、菌群失衡以及上皮应激反应的有用标志物和机制节点。
Reg IIIγ CRISPR激活质粒（m）提供了一种靶向、非破坏性的方法，可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性Reg3g的表达。
Reg IIIγ CRISPR激活质粒（m）是一个由三条质粒组成的协同激活介导（SAM）系统，旨在对人类细胞系中的Reg3g基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变（D10A 和 N863A）的无催化活性的 Cas9（dCas9）为核心，这些突变消除了核酸酶活性，同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合，并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用，并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA，其与两个MS2 RNA适配体融合，这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点，并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送，以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后，SAM复合物结合于Reg3g转录起始位点上游约200 bp处，VP64、p65和HSF1在此协同作用，招募转录 machinery并驱动内源性Reg IIIγ表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同， dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列，从而保留了原生的Reg3g位点，并能够研究内源性位点上依赖于Reg IIIγ的转录反应，使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在Reg3g表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟Reg IIIγ通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。