PTPRH Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406293

Descripción general

PTPRH (fosfatasa de tirosina proteica receptora tipo H) es una fosfatasa transmembrana de tipo receptor que modula la señalización por fosforilación de tirosina en la superficie celular, modelando las vías aguas abajo que controlan la proliferación, la adhesión y la motilidad celular. Al contrarrestar la actividad de las tirosina quinasas receptoras y las salidas de señalización asociadas de MAPK y PI3K/AKT, PTPRH puede influir en la respuesta a factores de crecimiento y en el comportamiento de las células epiteliales. La expresión o actividad desregulada de PTPRH se ha vinculado con estados alterados de señalización oncogénica y fenotipos asociados a tumores en múltiples contextos de cáncer, lo que la hace relevante para desentrañar redes reguladoras dependientes de la fosforilación. Como fosfatasa asociada a membrana, también es útil para estudiar la integración de señales entre estímulos extracelulares y circuitos intracelulares de quinasas/fosfatasas.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO PTPRH (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen PTPRH en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del PTPRH junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de PTPRH tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína PTPRH.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en PTPRH para la investigación de la señalización de PTPRH, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de PTPRH críticos para la función de PTPRH
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de PTPRH para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido PTPRH CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido PTPRH CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus PTPRH. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR PTPRH (h) y el plásmido HDR PTPRH (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología PTPRH para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana PTPRH definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.