PRMT8 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-404371

Übersicht

PRMT8 (Protein-Arginin-Methyltransferase 8) ist eine membranassoziierte PRMT vom Typ I, die die asymmetrische Dimethylierung von Argininresten an Proteinsubstraten katalysiert und dadurch Protein-Protein-Interaktionen, die subzelluläre Lokalisation sowie die Signalweitergabe moduliert. PRMT8 trägt zur Regulation posttranslationaler Modifikationsnetzwerke bei, die mit Zytoskelettdynamik, Vesikeltransport und signaltransduktiven, durch Argininmethylierung geprägten Signalwegen verknüpft sind. Die Aktivität von PRMT8 steht im Zusammenhang mit der Kontrolle neuronaler und synaptischer Prozesse, und veränderte Methylierungsprogramme der PRMT-Familie werden häufig in Kontexten der Neurobiologie, Zelldifferenzierung und onkogenen Signalgebung untersucht. Fehlregulierte Argininmethylierung und PRMT-assoziiertes Substrat-Remodeling werden zudem hinsichtlich ihrer Rolle in Stressantworten und Veränderungen der Proteostase erforscht, die in mehreren krankheitsrelevanten Modellen beobachtet werden.

Das PRMT8 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des PRMT8-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des PRMT8-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von PRMT8 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die PRMT8-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von PRMT8-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der PRMT8-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf PRMT8-Exone abzielen, die für die PRMT8-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere PRMT8-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom PRMT8 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom PRMT8 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des PRMT8-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das PRMT8 HDR-Plasmid (h) und PRMT8 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von PRMT8-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten PRMT8-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.