PPARγ Lentiviral Activation Particles (h): sc-400030-LAC

PPARG kodiert den Peroxisomen-Proliferator-aktivierten Rezeptor Gamma (PPARγ), einen ligandenaktivierten nukleären Rezeptor, der mit RXR Heterodimere bildet und so die Transkription an PPAR-Response-Elementen reguliert. PPARγ ist ein zentraler Regulator der Adipogenese, der Lipidaufnahme und -speicherung, der Glukosehomöostase sowie antiinflammatorischer Transkriptionsprogramme und integriert Signale von Fettsäuren und Eicosanoiden. Es moduliert Stoffwechsel- und Immunwege, darunter Insulinsignalisierung, Fettsäuremetabolismus und Makrophagen-Polarisation, mit weitreichenden Effekten auf zelluläre Differenzierung und Energiebilanz. Eine Fehlregulation der PPARG-Aktivität wird mit Merkmalen des metabolischen Syndroms, Insulinresistenz, der Biologie der nichtalkoholischen Fettlebererkrankung sowie entzündlichen Prozessen im Tumormikromilieu in Verbindung gebracht, was PPARG zu einem intensiv untersuchten Knotenpunkt der Immunometabolismus- und Krebsstoffwechsel-Forschung macht.

PPARγ Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente PPARG-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

PPARγ Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der PPARG-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen PPARγ-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen PPARG-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.