POLR3B CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-406739

개요

POLR3B는 tRNA, 5S rRNA 및 번역과 세포 성장에 필요한 기타 짧은 RNA를 포함한 소형 비암호화 RNA의 전사를 담당하는 다중 소단위 효소인 RNA 중합효소 III의 두 번째로 큰 소단위를 암호화합니다. POLR3B는 Pol III 산출량을 조절함으로써 리보솜 생합성, 단백질 항상성(프로테오스테이시스), 대사 적응에 영향을 미치며, 영양 및 스트레스 반응성 신호를 생합성 능력과 통합합니다. Pol III 전사의 교란은 세포질 핵산에 대한 선천면역 감지와, 증식 및 분화된 세포 상태 전반에서의 더 넓은 전사 항상성에도 영향을 줍니다. POLR3B의 병적 변이는 Pol III 관련 백질이영양증 스펙트럼 질환 및 신경발달 표현형과 연관되어 있어, 인간 세포에서 전사 기계의 기능 이상을 연구하는 데 중요한 유전자입니다.

POLR3B CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 POLR3B 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 POLR3B 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 POLR3B의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 POLR3B 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 POLR3B 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 POLR3B 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• POLR3B 기능에 중요한 POLR3B 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 POLR3B 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• POLR3B CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 POLR3B CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 POLR3B 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  POLR3B HDR 플라스미드 (h) 및 POLR3B HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 POLR3B 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 POLR3B 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.