Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (m) PMP22: sc-422323-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) PMP22 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide PMP22 Double Nickase (m) et le plasmide PMP22 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Pmp22. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: PMP22 Antibody (G-6): sc-515199
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) PMP22 | sc-422323-NIC | 20 µg | $410.00 |
La protéine de la myéline périphérique 22 (PMP22), codée par le gène murin *Pmp22*, est une glycoprotéine membranaire tétraspan fortement enrichie dans les cellules de Schwann et la myéline compacte, où elle contribue à réguler la composition et la stabilité de la membrane de myéline ainsi que la conduction nerveuse périphérique. PMP22 participe aux voies de trafic membranaire et de protéostasie, notamment au contrôle qualité du réticulum endoplasmique (RE) et au renouvellement endosomal–lysosomal, reliant ainsi son abondance à l’homéostasie de la myéline et aux programmes de différenciation des cellules de Schwann. Une altération de la dose de PMP22 ou son mauvais repliement est étroitement associée à des phénotypes de neuropathies périphériques, faisant de *Pmp22* un nœud clé pour étudier la myélinisation, les interactions axone–glie et la signalisation de réponse au stress dans le système nerveux périphérique.
PMP22 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Pmp22 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Pmp22. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Pmp22. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Pmp22.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.