plexin-B2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-431226

Descripción general

Plxnb2 codifica plexina‑B2, un receptor transmembrana para semaforinas de clase 4 que integra señales de guía con la remodelación del citoesqueleto y la motilidad celular. La señalización de plexina‑B2 influye en la actividad de las GTPasas de la familia Rho y se interconecta con vías de receptores tirosina quinasa para coordinar la adhesión, la migración y la morfogénesis durante el desarrollo neural y la organización tisular. En sistemas murinos, la función de Plxnb2 se estudia con frecuencia en la guía axonal, la ramificación epitelial y la regulación de las interacciones célula‑célula en tejidos en desarrollo y adultos. La desregulación de la señalización semaforina–plexina se ha vinculado con fenotipos aberrantes de migración e invasión en contextos relevantes para enfermedades, lo que respalda su utilidad como un nodo mecanístico en vías que controlan la arquitectura tisular.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO plexin-B2 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Plxnb2 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Plxnb2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Plxnb2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína plexin-B2.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Plxnb2 para la investigación de la señalización de plexin-B2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Plxnb2 críticos para la función de plexin-B2
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Plxnb2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido plexin-B2 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido plexin-B2 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Plxnb2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR plexin-B2 (m) y el plásmido HDR plexin-B2 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Plxnb2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Plxnb2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.