PI-9 Lentiviral Activation Particles (m): sc-423120-LAC

マウスのSerpinb9はPI-9をコードしており、PI-9はグランザイムBおよび関連する細胞傷害性プロテアーゼを阻害する細胞内セリンプロテアーゼ阻害因子（セルピン）です。これにより、顆粒依存性アポトーシスを調節し、免疫細胞における意図しない自己傷害（自傷的ダメージ）を抑制します。細胞傷害性リンパ球の脱顆粒後に下流でプロテアーゼ活性を制御することで、PI-9はカスパーゼ依存的な細胞死プログラム、免疫恒常性、ならびに炎症に伴う組織リモデリングに影響を与えます。Serpinb9の発現は、免疫特権、抗原駆動性のT細胞応答、サイトカインにより制御されるストレスシグナル伝達といった文脈で研究されています。PI-9活性の異常は、免疫介在性障害に対する感受性の変化や、疾患関連モデルにおける免疫回避表現型と関連づけられており、アポトーシスおよび免疫監視研究における機序解明の要所（メカニスティック・ノード）としての有用性を支持しています。

PI-9 レンチウイルス活性化粒子（m）は、完全な相乗的活性化メディエーター（SAM）転写活性化システムを、トランスダクション可能な高力価レンチウイルス粒子に封入することでこのニーズに対応し、より広範なヒト細胞タイプにおいて効率的なSerpinb9の発現上昇を可能にします。

PI-9 レンチウイルス活性化粒子（m）は、レンチウイルス媒介を介して、シナジー活性化メディエーター（SAM）システムのすべての機能的構成要素を届ける。このシステムは、標的細胞へ共導入される3種類の粒子製剤で構成されています。1つは、VP64転写活性化ドメインとブラスティシジン耐性遺伝子を融合させた、触媒活性のないdCas9（D10AおよびN863A変異）をコードするものです。ヒグロマイシン耐性遺伝子を有するMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードするもの；および、2つのMS2 RNAアプタマーと融合した標的特異的20塩基対sgRNAをコードし、プロマイシン耐性遺伝子を有するもの。レンチウイルスによる導入および発現カセットのゲノムへの組み込み後、SAM構成要素は安定して発現し、Serpinb9転写開始点の上流にある近位プロモーター領域内の標的座に集合する。そこでは、VP64、p65、およびHSF1が協調して作用し、内因性の転写機構を動員して、内因性PI-9の発現を持続的に上向きに調節する。ヌクレアーゼ不活性型dCas9を使用することで、二本鎖DNA切断の導入を回避し、天然のSerpinb9ゲノム座および制御機構を維持します。

レンチウイルス形式には、いくつかの実用的な利点があります。安定したゲノム組み込みにより、細胞分裂を経ても遺伝的に継承される活性化がサポートされます。高力価の粒子調製により、施設内でのウイルス生産の必要性がなくなります。また、初代培養細胞、非増殖性細胞、およびトランスフェクション抵抗性細胞との互換性により、実験の適用範囲が広がります。成功したトランスダクションは、プロマイシン、ハイグロマイシン、ブラスティシジンを用いた三重抗生物質選別により確認および選別が可能である。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。