PCID2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406324

Descripción general

PCID2 (PCI domain containing 2) codifica una proteína con dominio PCI implicada en el ensamblaje y la regulación de grandes complejos multiproteicos que coordinan el metabolismo del ARN y el control de la expresión génica. PCID2 se ha vinculado a procesos reguladores posranscripcionales, incluidos la vigilancia y la degradación del ARNm, y se estudia en el contexto de vías asociadas a la proteostasis que moldean la homeostasis celular. La alteración de estos procesos puede influir en la progresión del ciclo celular, las respuestas al estrés y los programas de diferenciación al modificar la estabilidad de los transcritos y la producción de proteínas. Las redes desreguladas de procesamiento del ARN y control de calidad se asocian con frecuencia a estados oncogénicos y a otras enfermedades complejas, lo que convierte a PCID2 en un objetivo útil para estudios mecanísticos de los circuitos de regulación génica.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO PCID2 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen PCID2 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del PCID2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de PCID2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína PCID2.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en PCID2 para la investigación de la señalización de PCID2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de PCID2 críticos para la función de PCID2
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de PCID2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido PCID2 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido PCID2 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus PCID2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR PCID2 (h) y el plásmido HDR PCID2 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología PCID2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana PCID2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.