Pax-8 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401757

Visão geral

PAX8 codifica Pax-8, um fator de transcrição do tipo paired box que regula a especificação de linhagens e a organogênese, com papéis proeminentes no desenvolvimento dos folículos tireoidianos e na diferenciação epitelial no rim e no sistema mülleriano. Pax-8 liga-se a motivos de DNA específicos de sequência para coordenar programas transcricionais que controlam a identidade celular, a proliferação e a sobrevivência, e coopera com outros reguladores transcricionais para moldar a cromatina e redes de expressão gênica. Em tecidos adultos, PAX8 ajuda a manter estados diferenciados, e a expressão desregulada ou rearranjos foram associados a controle transcricional alterado em várias neoplasias epiteliais, tornando-o um marcador frequente em estudos de origem tumoral. Essas funções posicionam PAX8 como um nó útil para investigar circuitos regulatórios gênicos do desenvolvimento, plasticidade epitelial e assinaturas de rastreamento de linhagem em modelos celulares humanos.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Pax-8 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene PAX8 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do PAX8, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do PAX8 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Pax-8.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de PAX8 para a investigação da sinalização de Pax-8, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) PAX8 críticos para a função Pax-8
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos PAX8 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Pax-8 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Pax-8 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus PAX8. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Pax-8 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Pax-8 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia PAX8 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo PAX8 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.