PARM-1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-406775

Übersicht

PARM1 kodiert das Prostata-androgenregulierte, mucinähnliche Protein 1 (PARM-1), ein mit dem endoplasmatischen Retikulum (ER) assoziiertes, mucinähnliches Protein, das an der Regulation der Anpassung an zellulären Stress sowie der Homöostase des sekretorischen Weges beteiligt ist. Beschriebene Funktionen verknüpfen PARM-1 mit Signalwegen der Unfolded-Protein-Response (UPR) und mit ER-Qualitätskontrollprozessen, die das Zellüberleben, die Empfindlichkeit gegenüber Apoptose und Differenzierungsprogramme beeinflussen. Die PARM1-Expression reagiert auf hormonelle Signale und gewebespezifische Kontextfaktoren und wurde in der Epithelbiologie sowie in tumorassoziierten Transkriptionsprofilen untersucht. Diese Eigenschaften machen PARM1 zu einem geeigneten Ausgangspunkt, um zu untersuchen, wie ER-gekoppelte Signalwege Proteostase, Wachstumsregulation und krankheitsrelevante Phänotypen in menschlichen Modellsystemen prägen.

Das PARM-1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des PARM1-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des PARM1-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von PARM1 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die PARM-1-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von PARM1-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der PARM-1-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf PARM1-Exone abzielen, die für die PARM-1-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere PARM1-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom PARM-1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom PARM-1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des PARM1-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das PARM-1 HDR-Plasmid (h) und PARM-1 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von PARM1-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten PARM1-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.