PAOX Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406710

Descripción general

El gen humano **PAOX** codifica la **poliamina oxidasa**, una enzima dependiente de flavina que cataliza la reconversión de poliaminas acetiladas, contribuyendo a la homeostasis celular de poliaminas y a la regulación de los reservorios intracelulares de espermidina y espermina. La actividad de PAOX vincula el catabolismo de poliaminas con la biología redox mediante la producción de peróxido de hidrógeno y aldehídos reactivos, lo que influye en las respuestas al estrés oxidativo, la función mitocondrial y una adaptación metabólica más amplia. A través de estos mecanismos, PAOX se estudia en vías que gobiernan la proliferación y la diferenciación celular, así como la señalización inducida por estrés. Las alteraciones del metabolismo de poliaminas y los subproductos oxidativos asociados a PAOX se investigan con frecuencia en el contexto de la biología del cáncer, la neurodegeneración y los procesos inflamatorios como correlatos moleculares del crecimiento desregulado y del daño celular.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO PAOX (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen PAOX en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del PAOX junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de PAOX tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína PAOX.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en PAOX para la investigación de la señalización de PAOX, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de PAOX críticos para la función de PAOX
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de PAOX para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido PAOX CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido PAOX CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus PAOX. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR PAOX (h) y el plásmido HDR PAOX (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología PAOX para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana PAOX definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.