Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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p41-ARCb Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419207
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- p41-ARCb El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico p41-ARCb, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: p41-ARCb Anticuerpo (C-3): sc-137125
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
p41-ARCb Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419207 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Arpc1b codifica p41-ARCb, una subunidad reguladora del complejo Arp2/3 que nuclea redes de actina ramificadas necesarias para la remodelación dinámica del citoesqueleto. En células de ratón, p41-ARCb sostiene procesos como la formación de lamelipodios, la migración celular, la endocitosis y las funciones efectoras de las células inmunitarias al coordinar la polimerización de actina aguas abajo de las GTPasas de la familia Rho y de los factores promotores de la nucleación. El ensamblaje de actina dependiente de Arp2/3 se integra con vías de señalización que controlan la adhesión, el tráfico vesicular y la organización de la sinapsis inmunológica. La actividad desregulada de ARPC1B/Arp2/3 se asocia con defectos en el comportamiento de células hematopoyéticas e inmunitarias y es relevante para estudiar fenotipos tipo inmunodeficiencia y mecanismos inflamatorios in vivo e in vitro.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO p41-ARCb (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Arpc1b en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Arpc1b junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Arpc1b tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína p41-ARCb.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Arpc1b para la investigación de la señalización de p41-ARCb, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Arpc1b críticos para la función de p41-ARCb
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Arpc1b para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido p41-ARCb CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido p41-ARCb CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Arpc1b. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR p41-ARCb (m) y el plásmido HDR p41-ARCb (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Arpc1b para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Arpc1b definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.