Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO Ox40 (h): sc-401326
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Ox40 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique Ox40, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Ox40 Antibody (H-10): sc-376014
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO Ox40 (h) | sc-401326 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
TNFRSF4 code OX40 (CD134), un récepteur de costimulation inductible de la superfamille des récepteurs du TNF, exprimé principalement sur les lymphocytes T CD4+ et CD8+ activés, ainsi que sur certains sous-ensembles de lymphocytes T régulateurs. Lorsqu’il est engagé par OX40L (TNFSF4), OX40 favorise l’expansion, la survie et la formation de cellules T mémoire via le recrutement d’adaptateurs TRAF et l’activation en aval des voies de signalisation NF-κB, MAPK et PI3K/AKT. Cet axe module la production de cytokines, le soutien aux centres germinatifs et l’équilibre entre réponses effectrices et régulatrices. Une signalisation OX40 dérégulée a été impliquée dans l’inflammation chronique et les mécanismes des maladies auto-immunes, et elle est également pertinente pour l’échappement immunitaire et la dysfonction des lymphocytes T associée aux tumeurs en oncologie.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO Ox40 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène TNFRSF4 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du TNFRSF4, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert TNFRSF4 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine Ox40.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en TNFRSF4 pour l'étude de la signalisation de Ox40, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de TNFRSF4 essentiels à la fonction de Ox40
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de TNFRSF4 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le Ox40 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le Ox40 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus TNFRSF4. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le Ox40 plasmide HDR (h) et le Ox40 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie TNFRSF4 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles TNFRSF4 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.