Partículas Lentivirales de Activación (h) OSMR β: sc-402700-LAC

OSMR β (receptor beta de oncostatina M) es una subunidad receptora de citocinas transmembrana que forma complejos de señalización con gp130 para mediar las respuestas a la citocina de la familia de IL-6 oncostatina M. La unión del ligando activa las vías JAK/STAT, MAPK/ERK y PI3K/AKT, influyendo en la diferenciación de células epiteliales y estromales, en programas transcripcionales inflamatorios y en la remodelación tisular. La señalización dependiente de OSMR β se estudia con frecuencia en contextos de inflamación crónica y fibrosis, así como en interacciones del microambiente tumoral que regulan la invasión y la dinámica de la matriz extracelular. Como receptor de superficie celular con salidas específicas de vía, OSMR se utiliza habitualmente para investigar redes transcripcionales impulsadas por citocinas y el “cross-talk” con la señalización de factores de crecimiento.

Las partículas de activación lentiviral OSMR β (h) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de OSMR en una gama más amplia de tipos de células humanas.

Las partículas de activación lentiviral OSMR β (h) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción OSMR, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de OSMR β. El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo OSMR y la arquitectura reguladora.

El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.