OGFR Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-407303

Descripción general

El receptor del factor de crecimiento opioide (OGFR) es un receptor opioide no clásico, expresado de forma ubicua, que se une a la [Met5]-encefalina (factor de crecimiento opioide) para regular la proliferación celular y la homeostasis tisular. La señalización de OGFR se caracteriza principalmente a través del eje OGF–OGFR, que modula la progresión del ciclo celular al influir en las vías de los inhibidores de las quinasas dependientes de ciclinas y al restringir la síntesis de ADN en diversos tipos celulares. Este receptor se ha implicado en la renovación epitelial, el comportamiento de células inmunitarias y estromales, y el control del crecimiento en respuesta al estrés, lo que vincula la biología de OGFR con contextos como la proliferación de células cancerosas, la reparación de heridas y la patología inflamatoria. Como resultado, la alteración de la expresión de OGFR se utiliza comúnmente para analizar redes endógenas de señalización inhibidora del crecimiento y su interacción con vías mitogénicas.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO OGFR (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen OGFR en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del OGFR junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de OGFR tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína OGFR.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en OGFR para la investigación de la señalización de OGFR, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de OGFR críticos para la función de OGFR
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de OGFR para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido OGFR CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido OGFR CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus OGFR. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR OGFR (h) y el plásmido HDR OGFR (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología OGFR para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana OGFR definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.