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Nup88慢病毒激活颗粒(h) | sc-404091-LAC | 200 µl | $455.00 |
NUP88 编码 Nup88,它是核孔复合体(NPC)的核心组分之一,通过组织核孔复合体的结构并调控货物跨核膜运输,从而参与核质运输过程。Nup88 通过与其他核孔蛋白及转运受体相互作用,参与调控 mRNA 输出、蛋白质的核内导入/导出、细胞周期进程以及应激响应信号传导等通路。NUP88 的表达水平或定位发生改变与核转运稳态受扰以及转录程序的异常调控相关,进而影响细胞增殖与分化。这些特性使 NUP88 成为研究核孔生物学、转运耦联信号以及核孔复合体功能障碍与疾病相关细胞表型之间联系机制的有用靶点。
Nup88 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 NUP88 表达。
Nup88 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在NUP88转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性Nup88表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 NUP88 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。