NPY4-R CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406230

概要

NPY4Rは、膵ポリペプチドによって選択的に活性化されるGi/o共役型GPCRであるニューロペプチドY受容体Y4（NPY4-R）をコードする。NPY4-RはcAMPシグナル伝達、イオンチャネル活性、ならびに下流のMAPK/ERK経路を調節する。NPY4-Rは末梢組織および中枢神経系（CNS）の特定領域に発現しており、神経内分泌入力を摂食行動、エネルギーバランス、消化管運動、自律神経制御の調節へと結び付ける。受容体の活性化は、アデニリルシクラーゼの抑制およびGβγサブユニットを介したシグナル伝達を通じて、細胞の興奮性や分泌プログラムに影響を与える。NPY4Rシグナルの変化は、代謝生理、肥満関連形質、消化管機能の調節といった文脈で研究されており、ニューロペプチド駆動の恒常性維持回路を検討するための機序的な切り口を提供する。

NPY4-R CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるNPY4R遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、NPY4R内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、NPY4Rのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、NPY4-Rタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、NPY4-Rシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、NPY4R欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• NPY4-Rの機能に不可欠なNPY4Rエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、NPY4Rゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• NPY4-R CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびNPY4-R CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、NPY4R遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  NPY4-R HDRプラスミド（h）および NPY4-R HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはNPY4Rホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のNPY4R標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。