NMD3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406373

概要

NMD3は、核内から細胞質へ前駆体60Sリボソームサブユニットを輸送するためのアダプターとして機能する、必須のリボソーム生合成因子をコードしています。CRM1/XPO1による核外輸送経路との協調や、60S成熟後期におけるリモデリング過程を介して、NMD3は翻訳能を備えたリボソームの生産的な組み立てとプロテオスタシスの維持を支えています。NMD3依存的なリボソーム輸送が破綻すると、ヌクレオラーストレス応答が誘導され、全体的な翻訳への下流影響を通じて細胞周期の進行が変化し得ます。リボソーム生合成は増殖制御と密接に結びついているため、この過程の異常な制御は、リボソーム病やがんに関連する翻訳リプログラミングなど、増殖性疾患およびストレス関連疾患の機序研究において重要です。

NMD3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるNMD3遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、NMD3内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、NMD3のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、NMD3タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、NMD3シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、NMD3欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• NMD3の機能に不可欠なNMD3エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、NMD3ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• NMD3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびNMD3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、NMD3遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  NMD3 HDRプラスミド（h）および NMD3 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはNMD3ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のNMD3標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。